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植物膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)

簡要描述:產品概述 product description 貝博TM BBproExtraTM植物膜蛋白提取試劑盒(雙向電泳用)是一種高效的高產膜蛋白提取試劑盒。植物膜蛋白提取試劑盒可以從各種植物中提取膜蛋白,可用于純化膜蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高質量的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白用于雙向電泳。如需要用于SDS-PAGE電泳檢測、Western blotting、凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、報告基因檢測、酶活分析等下游實驗的試劑盒,請聯系貝博,選用其它產品號的產品(BB-3152)。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-09-19
  • 訪  問  量:190

詳細介紹

保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
雙向電泳
適用樣本
植物
產品特點
1、 使用方便。
2、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
3、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
4、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產品應用
雙向電泳
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項:
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?
使用方法
1、 試劑準備:
每500ul膜提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物,充分混勻后置冰上備用。
2、 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg植物組織樣本用刀盡可能剪碎。
3、 加入500ul冷的提取液A,用組織勻漿機/勻漿器充分勻漿。
4、 勻漿后移入一個干凈離心管中在2-8℃振蕩1-2小時。
5、 將提取液在2-8℃條件下12000g離心5分鐘,取上清。
6、 在上清中加入5ul提取液B,充分混勻。
7、 在37℃水浴10分鐘。
8、 在37℃, 1000g離心3分鐘。
9、 此時液體分為2層,小心移除上層部分,吸取下層管底部大約50ul液體。
10、 用50-150μl冷的膜蛋白溶解液C溶解下層溶液,即得膜蛋白樣品。
11、 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
常見問題分析
1.蛋白濃度低?
膜蛋白豐度較低,需要盡可能加大細胞上樣量。處理部分組織樣本時可能沒有裂解,導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
2.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份,導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。
3.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結構,沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構象和活性。

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