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植物胞質蛋白提取試劑盒

簡要描述:產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 植物細胞質蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種植物細胞和各種實體植物組織,如葉片、根、種子等植物組織中提取細胞質蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內完成。制備的蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應用兼容。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-09-19
  • 訪  問  量:179

詳細介紹

保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
WB,IP等
適用樣本
植物
產品特點
1.使用方便。
2.含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
3.紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
4.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性。
產品應用
WB,IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項:
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?
使用方法
1. 提取液制備:
每1000ul預冷的蛋白提取液A中加入4ul蛋白酶抑制劑混合物,充分混勻后置冰上備用。
2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg植物組織樣本,用刀盡可能剪碎,然后加入500ul提取液A后用勻漿機/勻漿器充分勻漿。
3. 將勻漿液用100um細胞篩過濾。
4. 將濾液在200×g條件下離心3分鐘,棄沉淀,收集上清。
5. 將上清在4℃,800×g力條件下離心5分鐘。
6. 棄沉淀,將上清(I)移入另一干凈的離心管。
7. 在上清(I)中加入50ul胞質提取液B,高速渦旋振蕩15秒,充分混勻。
8. 在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
9. 在4℃,12000×g條件下離心10分鐘。
10. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即得到細胞質蛋白。
11. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
常見問題分析
1.蛋白濃度低?
處理部分樣本時可能沒有裂解,導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑B的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份,導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。

3.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結構,沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構象和活性。
參考文獻
1.Binhui Zhan, et al.
Functional Scanning of Apple Geminivirus Proteins as Symptom Determinants and Suppressors of Posttranscriptional Gene Silencing
Viruses 2018

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