酵母核蛋白提取試劑盒

簡要描述：產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 酵母核蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種酵母中提取核蛋白。提取過程簡單方便。制備的核蛋白純度高，保持天然活性，絕少交叉污染。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。

產品型號：
廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-09-19
訪問量：304

產品咨詢聯系我們

產品分類

CLASSIFICATION

蛋白質生物學

蛋白表達蛋白提取和裂解細胞器分離蛋白純化蛋白質濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學查看全部產品

相關文章ARTICLES

查看全部

詳細介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

一年

檢測方法

WB,IP等

適用樣本

酵母

產品特點

1.使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。
2.將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
3.含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。
4.紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
5.蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

產品應用

WB,IP等

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒

試劑準備

1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項

使用注意事項：
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?

使用方法

1. 提取液制備：
每200μl蛋白提取液D中分別加入2μl蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 酵母培養物，在4℃，1000×g條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集酵母沉淀。
3. 用PBS洗滌酵母兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每100μl體積酵母沉淀物中加入200μl酵母核蛋白提取液A，混勻后，在30℃條件下保溫15分鐘。
5. 在1000×g條件下離心5-10分鐘，棄上清，收集酵母沉淀。
6. 用500μl PBS洗滌酵母一次，離心收集菌體。
7. 酵母沉淀物中加入300-500μl酵母蛋白提取液B，充分混勻。
8. 在37℃或室溫條件下輕微振蕩45-60分鐘。
9. 在1000×g條件下離心5-10分鐘，收集沉淀，棄上清。
10. 用500μl PBS洗滌沉淀。離心收集沉淀。
11. 沉淀中加入400μl酵母核提取液 C，高速渦旋15秒混勻，然后在振蕩器上振蕩15-30分鐘。
12. 再次高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，2000×g條件下離心5分鐘，棄上清，留沉淀。
13. 在沉淀中加入200μl冷的核蛋白提取液D，充分混勻。
14. 置振蕩器上振蕩30-40分鐘。
15. 在4℃，12000×g條件下離心10分鐘。
16. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到酵母核蛋白。
17. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

常見問題分析

1.蛋白濃度低？
處理部分酵母樣本時可能沒有裂解，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑BC的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
酵母核蛋白豐度較低，在條件允許的情況下，加大酵母的上樣量。

2.用什么方法定量蛋白？
建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑D中含有干擾Bradford法的組份，導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

3.提取時出現膠狀沉淀？
蛋白提取液處理產物中有時會出現少量透明膠狀物，屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。不檢測和基因組DNA結合特別緊密的特定蛋白的情況下，可以直接離心取上清進行后續實驗即可；如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理，300w/10秒間隔10秒，超聲3分鐘，隨后離心取上清用于后續實驗。

4.提取的蛋白具有活性嗎？
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結構，沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構象和活性。

產品咨詢

上一篇：酵母核蛋白/胞質蛋白提取試劑盒
下一篇：核蛋白提取/總蛋白提取/膜蛋白提取試劑盒

亚洲国产精品久久久久久高潮_午夜福利在线观看丝袜_国产午夜手机精彩视频_精品久久久蜜桃嫩草av_亚洲国产精品五月天久久久_内射人妻精品_亚洲精品无码中字_亚州色一区_香蕉免费伦理电影网站_日本免费精品一区二区

酵母核蛋白提取試劑盒

留言框

產品：

您的單位：

您的姓名：

聯系電話：

常用郵箱：

省份：

詳細地址：

補充說明：

驗證碼：