酵母組蛋白提取試劑盒

簡要描述：產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 酵母組蛋白提取試劑盒適用于從各種昆蟲組織樣本中提取組蛋白。提取過程簡單方便，避免了重復性差的研磨法，超聲波法或壓榨法對酵母細胞的破壞，避免激烈的機械處理造成的氧化和熱度升高對目的蛋白的破壞作用。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、組蛋白修飾實驗比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。

產品型號：
廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-09-19
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蛋白質生物學

蛋白表達蛋白提取和裂解細胞器分離蛋白純化蛋白質濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學查看全部產品

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詳細介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

一年

檢測方法

WB,IP等

適用樣本

酵母

產品特點

1.使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。
2.含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。
3.紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
4.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

產品應用

WB,IP等

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒

試劑準備

1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項

使用注意事項：
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
? 下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過程保持低溫操作，縮短離心時間。

使用方法

1. 提取液制備：
每500ul蛋白提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。
2. 收集酵母培養物，在4℃，1000×g條件下離心5-10分鐘，吸干上清，收集酵母細胞。
3. 用冷PBS洗滌酵母細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每100-200mg濕重酵母細胞（或者100-200ul酵母沉淀體積）中加入250-500ul冷的酵母蛋白提取液E，充分混勻。
5. 在室溫或37℃條件下于振蕩30分鐘-2小時。
6. 在4℃，2000×g條件下離心5-10分鐘，棄上清，留沉淀。
7. 在沉淀中加入500ul蛋白提取液A，混勻后，在4℃條件下輕輕振蕩20-40分鐘。
8. 在4℃，16000×g條件下離心15分鐘，棄上清，留沉淀。
9. 沉淀中加入100ul組蛋白提取液B。
10. 用200ul槍頭反復吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻。
11. 置4℃冰箱過夜存放。
12. 在12000×g條件下離心10分鐘，收集上清。
13. 在上清中加入10-25ul 試劑C充分混勻。
14. 加入上樣緩沖液混勻后煮沸，分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

常見問題分析

1.蛋白濃度低？
處理部分樣本時可能沒有裂解，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑E和A的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
2.用什么方法定量蛋白？
建議用Bradford法。不適合用BCA法。

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