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植物單線態氧檢測試劑盒-綠色熒光

簡要描述:產品概述 product description 貝博® BBoxiProbe® 植物組織單線態氧(1O2)檢測試劑盒是一種利用新型熒光探針BBoxiProbe® O66進行植物組織單線態氧檢測的試劑盒。本試劑盒中的BBoxiProbe® O66 1O2探針為綠色熒光的單線態氧探針,具有506 / 526 nm的激發/發射波長。BBoxiProbe® O66 1O2探針在植物組織中單線態氧存在的條件下,被氧化生成綠色熒光物質,綠色熒光強度與植物組織內單線態氧水平成正比,檢測O66產物的熒光強度就可以知道植物組織內單線態氧的水平。在激發波長506 nm,發射波長526 nm附近,使用熒光分光光度計、熒光酶標儀等檢測O66產物熒光強度,從而測定植物組織內單線態氧水平。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-09-20
  • 訪  問  量:262

詳細介紹

保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項
1.探針長期不用可以-20℃保存。避免反復凍融。
2.探針為DMSO溶液,冬季氣溫較低時為凝固狀態,極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短時間水浴。吸頭也需要放在培養箱預熱,否者容易再次凝固在吸頭內壁產生損耗。
4.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
熒光分光光度計或熒光酶標儀
適用樣本
植物組織
產品特點
1.使用方便:可用熒光酶標儀、熒光分光光度計檢測;
2.背景低,靈敏度高;
3.線性范圍寬,使用方便。
儀器準備
1.熒光分光光度計或熒光酶標儀
2.勻漿機/勻漿器
3.離心機
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.純水
3.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
4.熒光檢測專用黑色96孔板
使用注意事項
1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體收集至管底,避免開蓋時液體灑落。
2.熒光探針為DMSO溶液,冬季氣溫較低時在室內時為凝固狀態,極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解,吸頭也需要放在培養箱預熱,否者容易再次凝固在吸頭內壁產生損耗。
3.使用前,先將本品取出回溫至室溫(20℃以上),并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。
4.盡量縮短探針標記后到測定所用的時間,以減少各種可能的誤差。
5.必須使用熒光檢測專用的黑色96孔板。

使用方法
試劑準備:
根據樣本數量,用純水將O66探針10倍稀釋。充分混勻,備用。
【注】:
?不可以一次性將探針全部稀釋。
?現配現用。
?O66探針液為DMSO溶液,冬季氣溫較低時在室溫時為凝固狀態,極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解,吸頭也需要放在培養箱預熱,否者容易再次凝固在吸頭內壁產生損耗。
?微量操作時,注意探針要有效加入勻漿液,避免沒有加入。
?以下步驟使用的O66探針為此步驟稀釋過的探針。

樣本處理:
1.剛取得的新鮮植物組織樣本用PBS洗凈。
2.準確稱取50 mg或100 mg植物組織樣本,加入500 μl-1 ml勻漿緩沖液A,用勻漿機/勻漿器充分勻漿。
3.在100×g,4℃離心5分鐘,取上清備用。

樣本檢測:
1.在96孔板中加入190微升勻漿上清液、10微升O66探針,用移液器吹打,使之充分混勻。
【注】:
?不同樣本的活性氧差異較大,需要根據預實驗結果調整探針用量。一般加入2-10 μl探針,染色終濃度按試劑盒中探針母液的200-1000倍稀釋,200倍稀釋適合大多數樣本。
?如果熒光強度太強,超過了檢測儀器的量程,可以減少探針用量。保證所有樣本探針用量一致即可。
?以酶標儀檢測為例。也可以用熒光分光光度計檢測,根據所使用儀器決定勻漿液體積和染色容器。
2.在37℃避光孵育20-30分鐘。
3.置于酶標儀中,后于激發波長為506 nm、發射波長526 nm檢測熒光強度。
【注】:
?或使用熒光光度計等其它熒光檢測設備。
?必須使用熒光檢測專用的黑色96孔板。
?如果熒光強度太強,超過了儀器的檢測范圍,可以將孵育后的勻漿上清液稀釋后再檢測。一般稀釋5-50倍。

蛋白定量:
1.另取50微升上清勻漿液,用PBS大約稀釋30倍。
2.取100微升進行蛋白定量。

結果處理:
以熒光強度(RFU)/ 蛋白濃度(毫克蛋白)表示植物組織單線態氧強度。
【注】:
?數據與蛋白濃度的單位無關。
?此處以蛋白濃度數據作為校正系數,對不同樣品進行均一化處理。
?熒光強度強則單線態氧(1O2)含量高。
?可以用實驗中對照樣本的熒光強度值為基準,待測組樣本的熒光強度值占對照樣本的百分比來比較單線態氧(1O2)程度差異。

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